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基于钙调蛋白的融合蛋白系统的开发和应用，用于WW和锌指模块的表达和纯化
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上传时间: 2020-06-05
详细说明：智人的钙调蛋白是一种α-螺旋钙结合蛋白，可在大肠杆菌中高水平表达。 当钙调蛋白变体的N末端与Ca2 +结合时，它会发生构象变化，从而暴露疏水口袋。 该性质可用于纯化目的，因为这些口袋以高亲和力结合到苯基琼脂糖树脂上。 用EDTA洗涤螯合蛋白质中的Ca2 +离子，诱导构象变化回到更折叠的状态，并从色谱柱上洗脱蛋白质。 我们在本文中描述了使用钙调蛋白变体和短连接子的蛋白表达和纯化技术，用于通过突变的NIa-Pro烟草蚀刻病毒蛋白酶进行蛋白水解切割。 我们已经表明，该方法可用于获得纯化数量的各种小蛋白，这些蛋白不能使用其他方法表达，包括足够高浓度的WW结构域蛋白以进行NMR结构分析。 我们还获得了在
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