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上传时间: 2020-06-03
详细说明：为了增强黑gram（Vigna mungo L.）的抗真菌反应，通过用CaMV 35S启动子转移细菌几丁质酶基因来产生转基因植物。 通过粒子枪法转化在子叶节上发育的切碎的多个芽细胞。 愈伤组织在补充了50 m·gl-1卡那霉素的Murashige和Skoog（MS）改性培养基上培养。 转化效率约为13％。 选择所得的芽，并再生抗生素抗性转基因苗。 从芽中提取转基因植物大约需要四到六个月的时间。 通过PCR，RT-PCR，Southern和western印迹分析证实了转基因的整合。 转基因植物表现出比未转化植物更高的几丁质酶活性。 几丁质酶活性通过天然聚丙烯酰胺凝胶内测定法检查。 在体外接种白粉病病原体（Erysiphae polyli DC）后，该疾病的延迟发作和较小的病变证明了转基因植物具有真菌耐受性。 转基因植物很好地适应了温室并且没有表现出任何表型改变。
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